磷酸化修饰组学
蛋白质磷酸化(Phosphorylation)是指蛋白质在磷酸化激酶的催化下,把ATP或GTP上的磷酸基转移到蛋白质的特定位点(氨基酸残基Ser、Tyr、Thr)上的过程。
磷酸化是一种广泛存在的翻译后修饰类型,细胞内有超过30%的蛋白质发生磷酸化修饰。因此磷酸化修饰是调节和控制蛋白质活力和功能的最基本、最普遍,也是最重要的机制。磷酸化参与各种生理和病理过程,调控细胞的增值、发育、分化、凋亡等生命活动,广泛运用在信号转导通路、细胞凋亡、发育分化、癌症机理等研究领域。
技术原理
首先将蛋白样本酶解成肽段混合物,然后使用液相色谱对酶解后的肽段混合物进行组分分离以降低样本复杂程度,然后通过高质量的磷酸化修饰类抗体和生物材料对修饰肽段进行富集,最后上样至液相色谱-串联质谱中进行分析定量。
参考文献
[1] Z. Wang, et al., 2018, Quantitative phosphoproteomic analysis of the molecular substrates of sleep need. Nature.
[2] Hoffman NJ, et al., 2015, Global Phosphoproteomic Analysis of Human Skeletal Muscle Reveals a Network of Exercise-Regulated Kinases and AMPK Substrates. Cell Metabolism.